轉(zhuǎn)染后需不需要換液這個(gè)問(wèn)題要根據(jù)每個(gè)小核酸轉(zhuǎn)染試劑的要求來(lái),市面上大部分的轉(zhuǎn)染試劑都會(huì)建議在轉(zhuǎn)染4-6h后進(jìn)行換液。那為什么會(huì)有轉(zhuǎn)染后的換液需要呢?主要有以下兩種原因:
第一種,有的轉(zhuǎn)染試劑在開(kāi)始轉(zhuǎn)染前即鋪板時(shí)就要求使用不含血清的培養(yǎng)基,因?yàn)檠鍟?huì)對(duì)轉(zhuǎn)染效果有影響,但是細(xì)胞的生長(zhǎng)需要血清提供營(yíng)養(yǎng),在無(wú)血清的環(huán)境下只能存活幾個(gè)小時(shí),所以轉(zhuǎn)染后必須更換完全培養(yǎng)基以維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)。
第二種,轉(zhuǎn)染試劑本身毒性比較大,轉(zhuǎn)染后如果不將培養(yǎng)基換掉,可能會(huì)對(duì)細(xì)胞造成嚴(yán)重死亡,因此會(huì)要求轉(zhuǎn)染4-6小時(shí)后進(jìn)行換液。
但是,對(duì)于毒性很低的Starvio siRNA轉(zhuǎn)染試劑來(lái)說(shuō),是不需要換液的,并且血清對(duì)轉(zhuǎn)染效果沒(méi)有影響,這點(diǎn)是很多轉(zhuǎn)染試劑所不具備的。如果大家是初次實(shí)驗(yàn),那么你做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候一定要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上針對(duì)是否需要換液的要求來(lái),而不是自己去決定要不要換液以及什么時(shí)候換液。我們所參考的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū),其實(shí)都是通過(guò)研發(fā)人員進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)得出來(lái)的一個(gè)最優(yōu)解。我們首先應(yīng)該相信這些最優(yōu)解,按照操作步驟去做,才能保證最大程度的發(fā)揮出試劑的性能。
另外,也要提醒一下大家,有些同學(xué)也許之前使用過(guò)好幾種品牌的轉(zhuǎn)染試劑,或者想用不同品牌的轉(zhuǎn)染試劑一起做平行對(duì)比實(shí)驗(yàn),很可能在這個(gè)過(guò)程中會(huì)混淆各個(gè)產(chǎn)品的操作流程及注意事項(xiàng),比如對(duì)不需要換液的產(chǎn)品在操作中進(jìn)行了換液處理,以至于出現(xiàn)轉(zhuǎn)染效果不佳的情況,這是一個(gè)及其容易被忽略但又是十分重要的問(wèn)題,希望大家引起重視,嚴(yán)格根據(jù)各個(gè)說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。